Пандемия COVID-19 подчеркнула необходимость быстрого и точного обнаружения нуклеиновых кислот в местах оказания медицинской помощи. Чтобы удовлетворить эту потребность, ученые из Института биомедицинской инженерии и технологий Сучжоу разработали новую платформу быстрого обнаружения нуклеиновых кислот SARS-CoV-2 без амплификации, основанную на иммуноферментном анализе с гибридным захватом флуоресценции (HC-FIA).
Использование моноклонального антитела S9.6 является отличительной особенностью этого процесса, который распознает двухцепочечные гибриды ДНК-РНК и позволяет преобразовать тестирование нуклеиновых кислот в иммунофлуоресценцию на простой индикаторной полоске с боковым потоком.
Вся процедура тестирования состоит из двух этапов, а именно гибридизации и иммунофлуоресцентного анализа, и ее можно завершить менее чем за час.
В этом процессе используются оптимизированные ДНК-зонды для нацеливания на консервативную открытую рамку считывания 1ab, белок оболочки и нуклеокапсидные области генома SARS-CoV-2, полученные из клинических образцов мазков из зева. Предел обнаружения составляет 500 копий / мл, что сравнимо с коммерческими наборами, основанными на количественной полимеразной цепной реакции в реальном времени (КПЦР). Кроме того, не было обнаружено значительных перекрестных реакций между зондами SARS-CoV-2 и 55 распространенными патогенами.
На работу реагента для обнаружения HC-FIA не влияют гемоглобин, муцин и различные возможные лекарственные препараты, которые могут присутствовать в клинических образцах. Этот набор для анализа и тестирования также может быть адаптирован для обнаружения других вирусных РНК.
Описанный здесь процесс HC-FIA был поддержан рандомизированным двойным слепым исследованием с участием 734 образцов. Текущее исследование не только представляет собой доказательство концепции, но также привело к разработке коммерческого тест-набора для диагностики SARS-CoV-2. Тестовый набор был недавно одобрен Национальным управлением медицинских продуктов и получил европейский сертификат соответствия.
Набор для тестирования требует немного оборудования и профессионального персонала для подтверждения инфекции. Он может функционировать как «лаборатория-чемодан» и, таким образом, использоваться как метод обнаружения на месте для амбулаторных отделений, отделений неотложной помощи, таможни и контроля заболеваний на низовом уровне.
«Мы уверены, что тест HC-FIA может служить надежной гарантией сдерживания эпидемии за счет сокращения распространения среди населения и завозных случаев, особенно в развивающихся странах», – сказал Ван Даминг, ведущий исследователь исследования.
